Rekonštitúcia a laboratórne meranie
Výpočty a laboratórna technika v jednoduchých krokoch. Ide len o laboratórny postup. Nič na tejto stránke nie je návodom na použitie u ľudí ani zvierat.
- Čo je rekonštitúcia?
- Čo obsahuje bakteriostatická voda?
- Ako sa peptid v laboratóriu rekonštituuje?
- Sterilná alebo bakteriostatická voda: aký je rozdiel?
- Kedy je bakteriostatická voda správnou voľbou?
- Prečo rozdeliť roztok na alikvoty?
- Ako vypočítať objem na natiahnutie?
- Je dobrý nápad zmraziť rozpustený peptid?
- Ako dlho zostáva peptid po rozpustení použiteľný?
- Ako skladovať liekovku pred rekonštitúciou?
- Čo znamená zakalený roztok?
- Ako vyzerá čistá manipulácia?
Čo je rekonštitúcia?
Rekonštitúcia znamená premenu lyofilizovaného prášku späť na kvapalinu pridaním rozpúšťadla. Pri peptidoch je týmto rozpúšťadlom zvyčajne bakteriostatická voda alebo sterilná voda. Dôležité sú tri voľby: aké rozpúšťadlo, koľko a ako ho pridáte. Zvolený objem určuje koncentráciu pre všetky ďalšie kroky.
Čo obsahuje bakteriostatická voda?
Je to sterilná voda s pridaným približne 0.9% benzylalkoholu. Benzylalkohol je konzervačná látka, ktorá brzdí rast baktérií. Vďaka nemu sa do liekovky dá vstúpiť viackrát bez toho, aby sa v nej baktérie namnožili. Preto je štandardným rozpúšťadlom pre laboratórnu prácu, ktorá vyžaduje viacero odberov z jednej liekovky.
Viac: bakteriostatická voda v porovnaní so sterilnou vodou →
Ako sa peptid v laboratóriu rekonštituuje?
Najprv nechajte liekovku dosiahnuť izbovú teplotu. Pomaly pridajte plánovaný objem rozpúšťadla tak, aby stekal po vnútornej stene liekovky, a nestriekajte ho priamo na prášok. Jemne krúžte, kým sa všetko nerozpustí. Netraste, pretože trasenie podporuje zhlukovanie a penenie. Zapíšte si pridaný objem, pretože určuje vašu koncentráciu.
Sterilná alebo bakteriostatická voda: aký je rozdiel?
Sterilná voda je pri zapečatení bez organizmov. Po otvorení liekovky už nič nebráni rastu. Bakteriostatická voda obsahuje približne 0.9% benzylalkoholu, ktorý drží rast pod kontrolou aj pri ďalších vstupoch. Sterilnú zvoľte na jednorazové použitie. Bakteriostatickú zvoľte pre liekovku, ktorú budete otvárať opakovane.
Viac: bakteriostatická voda v porovnaní so sterilnou vodou →
Kedy je bakteriostatická voda správnou voľbou?
Použite ju na rekonštitúciu lyofilizovaného materiálu, z ktorého budete odoberať viackrát. Benzylalkohol obmedzuje rast baktérií medzi odbermi. Ak sa prípravok použije len raz, postačí obyčajná sterilná voda. Konzervačná látka má zmysel len vtedy, keď sa do liekovky bude vstupovať opakovane.
Viac: bakteriostatická voda v porovnaní so sterilnou vodou →
Prečo rozdeliť roztok na alikvoty?
Alikvot je odmeraná časť odobratá z väčšej vzorky. Ak rekonštituovaný materiál rozdelíte na jednorazové alikvoty, každá časť sa zmrazí a rozmrazí len raz. Tým celú šaržu ušetríte poškodenia, ktoré sa hromadí pri opakovaných cykloch zmrazenia a rozmrazenia.
Ako vypočítať objem na natiahnutie?
Koncentrácia je hmotnosť delená objemom. Liekovka s 10 mg rozpustená v 2 mL teda obsahuje 5 mg v každom mL. Ak chcete zistiť objem pre dané množstvo, vydeľte toto množstvo koncentráciou. Všetky hodnoty majte od začiatku do konca v tej istej jednotke. Zámena miligramov a mikrogramov posunie výsledok 1000-násobne.
Je dobrý nápad zmraziť rozpustený peptid?
Zmrazovanie sa niekedy používa, ale ako dobre ho daný peptid znáša, často nie je známe, a každý cyklus zmrazenia a rozmrazenia pridáva poškodenie, a to koncentrovanými rozpustenými látkami aj fyzickým namáhaním. Ak zmrazujete, rozdeľte roztok vopred na jednorazové alikvoty, aby sa každý rozmrazil len raz. Najškodlivejším zvykom je opakovane zmrazovať a rozmrazovať jednu liekovku.
Ako dlho zostáva peptid po rozpustení použiteľný?
Oveľa kratšie ako suchý prášok. Presné obdobie závisí od peptidu, jeho koncentrácie, rozpúšťadla a teploty. Bežne používané konzervatívne pravidlo pre otvorenú viacdávkovú liekovku je 28 dní v chladničke. Nikdy nepočítajte s mesiacmi. Hneď ako je prítomná voda, reakcie rozkladu sa znova rozbehnú. Práve preto sa materiál posiela v suchom stave.
Ako skladovať liekovku pred rekonštitúciou?
Nechajte liekovku zapečatenú a uchovávajte ju na chladnom, tmavom a suchom mieste, kým ju nebudete potrebovať. Neotvorený lyofilizovaný materiál je najstabilnejší presne v stave, v akom dorazil. Pred porušením uzáveru ho nechajte zohriať na izbovú teplotu. Tým zabránite kondenzácii vzdušnej vlhkosti na prášku.
Čo znamená zakalený roztok?
Zakalenie po rekonštitúcii zvyčajne poukazuje na materiál, ktorý sa nerozpustil alebo sa zhlukol. Nie je to jednoducho znak riedenia. Bežnými príčinami sú príliš prudké pridanie rozpúšťadla, trasenie namiesto krúženia alebo práca s liekovkou, ktorá je ešte studená. Ak jemné krúženie roztok nevyčíri, nepredpokladajte, že má uvedenú koncentráciu.
Ako vyzerá čistá manipulácia?
Pracujte na čistom povrchu. Pred každým vstupom utrite gumovú zátku liekovky tampónom. Zakaždým použite novú ihlu. Nedotýkajte sa ničoho, čo príde do kontaktu s obsahom. Kontaminácia sa zvyčajne dostane dnu cez opakované vstupy s opakovane použitými ihlami, nie z materiálu.