Rekonstitūcija un laboratorijas mērījumi
Aprēķini un darba tehnika vienkāršos soļos. Šī ir tikai laboratorijas procedūra. Nekas šajā lapā nav norādījums lietošanai cilvēkiem vai dzīvniekiem.
- Kas ir rekonstitūcija?
- Kas ir bakteriostatiskajā ūdenī?
- Kā peptīdu rekonstituē laboratorijā?
- Sterils ūdens vai bakteriostatiskais ūdens: kā tie atšķiras?
- Kad bakteriostatiskais ūdens ir pareizā izvēle?
- Kāpēc sadalīt šķīdumu alikvotās?
- Kā aprēķināt ievelkamo tilpumu?
- Vai izšķīdināta peptīda sasaldēšana ir laba ideja?
- Cik ilgi peptīds pēc izšķīdināšanas saglabājas lietojams?
- Kā flakons jāuzglabā pirms rekonstitūcijas?
- Ko nozīmē duļķains šķīdums?
- Kā izskatās tīra apiešanās?
Kas ir rekonstitūcija?
Rekonstitūcija nozīmē liofilizēta pulvera atkārtotu pārvēršanu šķidrumā, pievienojot šķīdinātāju. Peptīdiem šis šķīdinātājs parasti ir bakteriostatiskais ūdens vai sterils ūdens. Svarīgas ir trīs izvēles: kurš šķīdinātājs, cik daudz un kā to pievienot. Izvēlētais tilpums nosaka koncentrāciju visiem turpmākajiem soļiem.
Lasīt vairāk: pētniecības peptīdu rekonstitūcija soli pa solim →
Kas ir bakteriostatiskajā ūdenī?
Tas ir sterils ūdens, kam pievienots aptuveni 0.9% benzilspirta. Benzilspirts ir konservants, kas kavē baktēriju augšanu. Pateicoties tam, flakonu var caurdurt vairāk nekā vienu reizi, baktērijām tajā neuzkrājoties. Tādēļ tas ir standarta šķīdinātājs laboratorijas darbam, kurā no viena flakona jāņem vairākas devas.
Lasīt vairāk: bakteriostatiskais ūdens salīdzinājumā ar sterilu ūdeni →
Kā peptīdu rekonstituē laboratorijā?
Vispirms ļaujiet flakonam sasilt līdz istabas temperatūrai. Lēnām pievienojiet plānoto šķīdinātāja tilpumu, ļaujot tam notecēt pa flakona iekšējo sienu, nevis izsmidzinot to uz pulvera. Saudzīgi grieziet, līdz viss izšķīst. Nekratiet, jo kratīšana veicina sarecēšanu un putošanos. Pierakstiet pievienoto tilpumu, jo tas nosaka koncentrāciju.
Lasīt vairāk: pētniecības peptīdu rekonstitūcija soli pa solim →
Sterils ūdens vai bakteriostatiskais ūdens: kā tie atšķiras?
Sterils ūdens noslēgtā veidā ir brīvs no organismiem. Kad flakons ir atvērts, nekas neaptur mikroorganismu augšanu. Bakteriostatiskais ūdens satur aptuveni 0.9% benzilspirta, kas ierobežo augšanu arī pēc atkārtotas caurduršanas. Izvēlieties sterilu ūdeni vienreizējai lietošanai. Izvēlieties bakteriostatisko ūdeni flakonam, kuru atvērsiet atkal un atkal.
Lasīt vairāk: bakteriostatiskais ūdens salīdzinājumā ar sterilu ūdeni →
Kad bakteriostatiskais ūdens ir pareizā izvēle?
Izmantojiet to liofilizēta materiāla rekonstitūcijai, ja no tā ņemsiet vairākas reizes. Benzilspirts ierobežo baktēriju augšanu starp ņemšanas reizēm. Ja preparātu izmanto tikai vienreiz, pietiek ar parastu sterilu ūdeni. Konservants ir vērtīgs tikai tad, ja flakons tiks caurdurts atkārtoti.
Lasīt vairāk: bakteriostatiskais ūdens salīdzinājumā ar sterilu ūdeni →
Kāpēc sadalīt šķīdumu alikvotās?
Alikvota ir izmērīta daļa, kas paņemta no lielāka parauga. Ja rekonstituētu materiālu sadalāt vienreizējas lietošanas alikvotās, katra daļa tiek sasaldēta un atkausēta tikai vienreiz. Tas pasargā visu partiju no bojājumiem, kas uzkrājas atkārtotos sasaldēšanas un atkausēšanas ciklos.
Kā aprēķināt ievelkamo tilpumu?
Koncentrācija ir masa, dalīta ar tilpumu. Tātad 10 mg flakons, izšķīdināts 2 mL, satur 5 mg katrā mL. Lai atrastu tilpumu noteiktam daudzumam, daliet šo daudzumu ar koncentrāciju. Visus skaitļus no sākuma līdz beigām izsakiet vienās un tajās pašās mērvienībās. Sajaucot miligramus un mikrogramus, rezultāts kļūdās 1000 reizes.
Lasīt vairāk: pētniecības peptīdu rekonstitūcija soli pa solim →
Vai izšķīdināta peptīda sasaldēšana ir laba ideja?
Sasaldēšanu dažkārt izmanto, taču bieži nav zināms, cik labi konkrētais peptīds to panes, un katrs sasaldēšanas un atkausēšanas cikls palielina bojājumus, ko rada koncentrētas izšķīdušās vielas un fiziska slodze. Ja tomēr sasaldējat, iepriekš sadaliet šķīdumu vienreizējas lietošanas alikvotās, lai katra tiktu atkausēta tikai vienreiz. Viskaitīgākais paradums ir viena flakona sasaldēšana un atkausēšana atkal un atkal.
Lasīt vairāk: cik ilgi izšķīdināts peptīds saglabājas lietojams →
Cik ilgi peptīds pēc izšķīdināšanas saglabājas lietojams?
Daudz īsāku laiku nekā sausais pulveris. Precīzs laiks ir atkarīgs no peptīda, tā koncentrācijas, šķīdinātāja un temperatūras. Bieži izmantots piesardzīgs noteikums atvērtam vairāku devu flakonam ir 28 dienas ledusskapī. Nekad neplānojiet mēnešiem ilgi. Tiklīdz ir klāt ūdens, sadalīšanās reakcijas atsākas. Tieši tāpēc materiāls tiek sūtīts sausā veidā.
Lasīt vairāk: cik ilgi izšķīdināts peptīds saglabājas lietojams →
Kā flakons jāuzglabā pirms rekonstitūcijas?
Atstājiet flakonu noslēgtu un glabājiet to vēsā, tumšā un sausā vietā, līdz tas ir vajadzīgs. Neatvērts liofilizēts materiāls ir visstabilākais tieši tādā stāvoklī, kādā tas pienāca. Pirms aizzīmoguma noņemšanas ļaujiet tam sasilt līdz istabas temperatūrai. Tas neļauj gaisa mitrumam kondensēties uz pulvera.
Ko nozīmē duļķains šķīdums?
Duļķainība pēc rekonstitūcijas parasti norāda uz materiālu, kas nav izšķīdis vai ir saķēries kopā. Tā nav vienkārši atšķaidīšanas pazīme. Biežākie cēloņi ir pārāk spēcīga šķīdinātāja pievienošana, kratīšana grozīšanas vietā vai darbs ar flakonu, kas vēl ir auksts. Ja saudzīga grozīšana to nenovērš, nepieņemiet, ka šķīdumam ir norādītā koncentrācija.
Kā izskatās tīra apiešanās?
Strādājiet uz tīras virsmas. Pirms katras caurduršanas noslaukiet flakona gumijas aizbāzni ar tamponu. Katru reizi izmantojiet jaunu adatu. Nepieskarieties nekam, kas nonāks saskarē ar saturu. Piesārņojums parasti iekļūst atkārtotās caurduršanas reizēs ar atkārtoti lietotām adatām, nevis no paša materiāla.