Feloldás és laboratóriumi mérés
A számítás és a laboratóriumi technika, egyszerű lépésekben. Ez kizárólag laboratóriumi eljárás. Ezen az oldalon semmi sem útmutatás emberen vagy állaton történő alkalmazáshoz.
- Mi a feloldás (rekonstitúció)?
- Mi van a bakteriosztatikus vízben?
- Hogyan oldanak fel egy peptidet a laboratóriumban?
- Steril víz vagy bakteriosztatikus víz: miben különböznek?
- Mikor a bakteriosztatikus víz a helyes választás?
- Miért érdemes az oldatot aliquotokra osztani?
- Hogyan számítható ki a felszívandó térfogat?
- Jó ötlet-e lefagyasztani az oldott peptidet?
- Meddig használható a peptid feloldás után?
- Hogyan kell tárolni a fiolát feloldás előtt?
- Mit jelent a zavaros oldat?
- Hogyan néz ki a tiszta munkavégzés?
Mi a feloldás (rekonstitúció)?
A feloldás azt jelenti, hogy a liofilizált port oldószer hozzáadásával ismét folyadékká alakítják. Peptideknél ez az oldószer általában bakteriosztatikus víz vagy steril víz. Három döntés számít: melyik oldószer, mennyi, és hogyan adja hozzá. A választott térfogat határozza meg a koncentrációt minden további lépéshez.
Mi van a bakteriosztatikus vízben?
Steril víz, körülbelül 0,9% benzil-alkohollal. A benzil-alkohol tartósítószer, amely visszafogja a baktériumok szaporodását. Ennek köszönhetően a fiolába többször is be lehet szúrni anélkül, hogy benne baktériumok szaporodnának el. Ezért ez a standard oldószer olyan laboratóriumi munkához, amely egy fiolából több felszívást igényel.
Bővebben: a bakteriosztatikus víz és a steril víz összehasonlítása →
Hogyan oldanak fel egy peptidet a laboratóriumban?
Először hagyja, hogy a fiola szobahőmérsékletűre melegedjen. Lassan adja hozzá a tervezett mennyiségű oldószert úgy, hogy az a fiola belső falán folyjon le, ne a porra spriccelje. Óvatosan forgassa körkörösen, amíg minden fel nem oldódik. Ne rázza, mert a rázás csomósodást és habzást okoz. Jegyezze fel a hozzáadott térfogatot, mert ez határozza meg a koncentrációt.
Steril víz vagy bakteriosztatikus víz: miben különböznek?
A steril víz lezárt állapotban mentes a mikroorganizmusoktól. A fiola felbontása után semmi sem akadályozza meg a szaporodást. A bakteriosztatikus víz körülbelül 0,9% benzil-alkoholt tartalmaz, amely a későbbi beszúrások során is kordában tartja a szaporodást. Egyszeri használatra válasszon steril vizet. Olyan fiolához, amelyet újra és újra megnyit, válasszon bakteriosztatikus vizet.
Bővebben: a bakteriosztatikus víz és a steril víz összehasonlítása →
Mikor a bakteriosztatikus víz a helyes választás?
Olyan liofilizált anyag feloldásához használja, amelyből többször fog felszívni. A benzil-alkohol a felszívások között korlátozza a baktériumok szaporodását. Ha a készítményt csak egyszer használják, a sima steril víz is megfelel. A tartósítószer csak akkor éri meg, ha a fiolába ismételten beszúrnak.
Bővebben: a bakteriosztatikus víz és a steril víz összehasonlítása →
Miért érdemes az oldatot aliquotokra osztani?
Az aliquot egy nagyobb mintából kimért adag. Ha a feloldott anyagot egyszer használatos aliquotokra osztja, minden adagot csak egyszer fagyaszt le és olvaszt fel. Ez megkíméli a teljes tételt attól a károsodástól, amely az ismételt fagyasztási-olvasztási ciklusokkal felhalmozódik.
Hogyan számítható ki a felszívandó térfogat?
A koncentráció a tömeg osztva a térfogattal. Így egy 2 mL-ben feloldott 10 mg-os fiola mL-enként 5 mg-ot tartalmaz. Egy adott mennyiséghez tartozó térfogat kiszámításához ossza el ezt a mennyiséget a koncentrációval. Minden értéket az elejétől a végéig ugyanabban a mértékegységben tartson. A milligramm és a mikrogramm összekeverése 1000-szeres hibát okoz az eredményben.
Jó ötlet-e lefagyasztani az oldott peptidet?
A fagyasztást néha alkalmazzák, de hogy egy adott peptid mennyire tűri, gyakran ismeretlen, és minden fagyasztási-olvasztási ciklus további károsodást okoz a koncentrálódó oldott anyagok és a fizikai igénybevétel révén. Ha mégis fagyaszt, előtte ossza az oldatot egyszer használatos aliquotokra, hogy mindegyik csak egyszer olvadjon fel. A legkárosabb szokás ugyanannak a fiolának az újra és újra történő lefagyasztása és felolvasztása.
Meddig használható a peptid feloldás után?
Sokkal rövidebb ideig, mint a száraz por. A pontos időtartam a peptidtől, a koncentrációtól, az oldószertől és a hőmérséklettől függ. Egy felbontott, többadagos fiolára gyakran alkalmazott óvatos szabály 28 nap hűtőben. Soha ne tervezzen hónapokkal. Amint víz van jelen, a lebomlási reakciók újraindulnak. Pontosan ezért szállítják az anyagot szárazon.
Hogyan kell tárolni a fiolát feloldás előtt?
Hagyja a fiolát lezárva, és tartsa hideg, sötét és száraz helyen, amíg szüksége nincs rá. A bontatlan liofilizált anyag pontosan abban az állapotban a legstabilabb, ahogyan megérkezett. Mielőtt feltöri a zárást, hagyja szobahőmérsékletűre melegedni. Így a levegő nedvessége nem csapódik le a poron.
Mit jelent a zavaros oldat?
A feloldás utáni zavarosság általában fel nem oldódott vagy összecsomósodott anyagra utal. Nem egyszerűen a hígítás jele. Gyakori okai: az oldószer túl erőteljes hozzáadása, körkörös forgatás helyett rázás, vagy még hideg fiolával való munka. Ha az óvatos forgatás nem tisztítja ki, ne feltételezze, hogy az oldat a megadott koncentrációjú.
Hogyan néz ki a tiszta munkavégzés?
Tiszta felületen dolgozzon. Minden beszúrás előtt törölje le a fiola gumidugóját egy tamponnal. Minden alkalommal új tűt használjon. Ne érintsen meg semmit, ami érintkezésbe kerül a tartalommal. A szennyeződés általában az újrafelhasznált tűkkel végzett ismételt beszúrásokkal jut be, nem az anyagból.