Skladovanie lyofilizovaných peptidov v laboratóriu

Spôsob skladovania peptidu rozhoduje o tom, nakoľko sa naň môžete spoľahnúť. Lyofilizované peptidy sú stabilné, no teplo, vlhkosť, svetlo a opakované zmrazovanie a rozmrazovanie ich postupne poškodzujú. Toto pomalé poškodenie nenápadne narúša reprodukovateľnosť.

Táto príručka opisuje praktické skladovanie lyofilizovaných peptidov v laboratóriu, od dňa doručenia liekovky až po dlhodobú archiváciu.

Čo vás stojí zlé skladovanie

Peptidy sa rozkladajú hydrolýzou, oxidáciou a agregáciou. Pri správnom skladovaní môže lyofilizovaný peptid zostať stabilný roky. V teple a vlhku môže ten istý materiál stratiť integritu v priebehu mesiacov. Produkty rozkladu sú zvyčajne neviditeľné, takže zlé skladovanie málokedy vyzerá ako problém. Prejaví sa namiesto toho ako kolísajúce, nereprodukovateľné výsledky.

Suchý prášok verzus roztok

Ak si zapamätáte jedno pravidlo, nech je to toto: suchý lyofilizovaný prášok vydrží oveľa lepšie než rekonštituovaný roztok. Suchý prášok neobsahuje takmer žiadnu vodu a práve voda spôsobuje hydrolýzu. Po rozpustení peptidu sa degradácia prudko zrýchli. Nechajte ho vo forme prášku až do chvíle, keď ho potrebujete.

Výber teploty

Pri zapečatených liekovkách s práškom je voľba teploty kompromisom medzi pohodlím a trvanlivosťou:

• Izbová teplota: vhodná len na krátky čas, spravidla od menej než niekoľkých týždňov až do približne 3 mesiacov, na chladnom, suchom a tmavom mieste. Praktická pre materiál, s ktorým práve pracujete.
• V chladničke, 2–8°C: vhodné na strednodobé skladovanie počas týždňov až mesiacov.
• Zmrazené, −20°C: bežná voľba na dlhodobé uchovávanie lyofilizovaného peptidu. Mnohé zostávajú stabilné dva roky aj dlhšie.
• Hlboko zmrazené, −80°C: vyhradené na dlhodobú archiváciu cenných alebo citlivých zásob.

Vlhkosť, svetlo a kyslík

Okrem teploty urýchľujú rozklad tri faktory. Vlhkosť umožňuje hydrolýzu, preto liekovky nechávajte zapečatené a zvážte pridanie vysúšadla do úložného boxu. Svetlo, najmä UV, môže fotooxidovať citlivé zvyšky, preto liekovky uchovávajte v tme. Kyslík napáda zvyšky, ako je metionín a cysteín. Kvalitní dodávatelia plnia liekovky pod inertným plynom a vy zo svojej strany udržujte čas, keď je liekovka otvorená, čo najkratší.

Zmrazovanie a rozmrazovanie

Každé kolo zmrazenia a rozmrazenia peptid zaťažuje a môže podporiť agregáciu. Praktickým riešením je alikvotovanie. Namiesto opakovaného zmrazovania a rozmrazovania jednej zásoby rozdeľte rekonštituovaný peptid na jednorazové dávky, aby sa každá rozmrazila len raz. Pri lyofilizovanej zásobe vyberte len potrebné množstvo a zvyšok ihneď vráťte do skladu.

Uchovávanie rekonštituovaného peptidu

Po rekonštitúcii je použiteľnosť oveľa kratšia a to, ako krátka, závisí od peptidu a rozpúšťadla. Ak pre vašu látku nemáte údaje, bežne používané konzervatívne pravidlo pre otvorenú viacdávkovú liekovku je 28 dní v chladničke pri 2–8 °C, podľa USP General Chapter <797> (podľa zhrnutia Ministerstva zdravotníctva štátu Minnesota). Ak dokumentácia uvádza kratšiu lehotu, riaďte sa ňou. Neplánujte s ničím dlhším. Každý alikvot označte látkou, jej koncentráciou a dátumom. Rekonštituovaný roztok berte ako krátkodobú pracovnú zásobu, nie ako niečo na archiváciu.

Trvanlivosť a vedenie záznamov

Pri správnom skladovaní zostávajú lyofilizované výskumné peptidy bežne stabilné dva roky aj dlhšie. Certifikát analýzy každej šarže si uschovajte, aby sa každá liekovka dala spätne priradiť k svojej šarži a testovanej čistote. Ak bol materiál skladovaný dlho alebo v podmienkach, za ktoré nemôžete ručiť, pred použitím na dôležitú prácu ho znovu overte.