Čistost in laboratorijski testi
Če podatka o čistosti ne morete preveriti, je to le trženje. Tukaj je, kaj v resnici meri vsak test za tem podatkom.
- Kaj vam pove podatek o čistosti 99% HPLC?
- Kaj meri masna spektrometrija?
- Kako poteka testiranje HPLC?
- Kaj zajema nadzor kakovosti?
- Zakaj sta potrebni tako HPLC kot masna spektrometrija?
- Kdaj je testiranje resnično zunanje?
- Zakaj morajo biti serije enotne?
- Kako brati kromatogram HPLC?
- Zakaj testirati na endotoksine?
- Ali „raziskovalna kakovost“ sploh kaj pomeni?
- Kako lahko trditev o čistosti preverite sami?
Kaj vam pove podatek o čistosti 99% HPLC?
Pove vam, da je 99% materiala, ki ga je zaznal detektor, med ločevanjem izšlo kot ciljni vrh. Gre za razmerje površin vrhov, ne za popolno razčlenitev tega, kar je v viali. Ne upošteva vode, preostalih soli in, kar je ključno, ali je ta vrh prava molekula. Za identiteto je potreben lasten test.
Kaj meri masna spektrometrija?
Vzorec pretvori v ione in izmeri njihovo razmerje med maso in nabojem. Pri peptidu to razreši vprašanje identitete. Ali je izmerjena masa enaka masi, izračunani iz predvidenega zaporedja? Preprosto povedano: HPLC pokaže, kako čist je vzorec. Masna spektrometrija pokaže, kaj vzorec dejansko je.
Kako poteka testiranje HPLC?
HPLC pomeni tekočinska kromatografija visoke ločljivosti. Vzorec se pod tlakom potisne skozi gosto napolnjeno kolono. Vsaka sestavina se premika s svojo hitrostjo, odvisno od tega, kako močno se oprijema materiala kolone. Zato sestavine izstopijo ob različnih časih. Detektor vsako zabeleži kot vrh. Primerjava površin vrhov da podatek o čistosti.
Kaj zajema nadzor kakovosti?
Nadzor kakovosti pomeni preverjanja, ki jih mora serija opraviti pred sprostitvijo. Zajemajo identiteto, čistost in videz ter sterilnost in endotoksine, kjer je to potrebno. Najpomembnejše je vodenje evidenc. Vsak rezultat se zabeleži pod številko serije. Tako je mogoče katero koli posamezno vialo izslediti do natančnih podatkov, na podlagi katerih je bila sproščena.
Zakaj sta potrebni tako HPLC kot masna spektrometrija?
Vsaka odgovori na drugo vprašanje in nobena ne more nadomestiti druge. HPLC razdeli mešanico in poroča, kolikšen delež predstavlja glavna sestavina. To je čistost. Masna spektrometrija stehta molekulo in potrdi, da gre za predvideno spojino. To je identiteta. Vzorec je lahko 99% ena snov in je še vedno napačna snov.
Kdaj je testiranje resnično zunanje?
Ko test izvede in poročilo izda laboratorij, ki nima nobenega interesa pri izidu. Certifikat, ki nosi lastno ime in referenčno številko neodvisnega laboratorija, ustreza. Notranji rezultat dobavitelja, pretipkan na predlogo z blagovno znamko, ne ustreza. To velja ne glede na to, kako uradno je predloga videti.
Zakaj morajo biti serije enotne?
Rezultat, ki ga nihče ne more ponoviti, ni prav veliko vreden. Če se material od serije do serije spreminja, lahko vsaka razlika, ki jo opazite, izhaja iz serije in ne iz spremenljivke, ki ste jo želeli testirati. Dokumentacija za vsako serijo spremeni „isto serijo“ v zabeleženo dejstvo namesto ugibanja.
Kako brati kromatogram HPLC?
Retencijski čas poteka vzdolž osi x. Odziv detektorja poteka navzgor po osi y. Visoki vrh je vaša spojina, njegov retencijski čas pa se mora ujemati z referenco. Nato preverite tri stvari. Ali je osnovna črta med vrhovi čista? Ali se majhni vrhovi gnetejo blizu glavnega? Ali je glavni vrh simetričen? Rama ali vlečen rep nakazujeta nečistoto, ki izhaja iz kolone skupaj z njim.
Zakaj testirati na endotoksine?
Endotoksini so deli bakterijske celične stene. Preživijo sterilizacijo in lahko izkrivijo biološke teste. Običajni test je test LAL, rezultati pa so podani v endotoksinskih enotah. Endotoksin je ločeno vprašanje od sterilnosti. Vzorec morda sploh ne vsebuje živih organizmov, pa vseeno vsebuje endotoksin, ki so ga pustile prej uničene bakterije.
Ali „raziskovalna kakovost“ sploh kaj pomeni?
V idealnem primeru pomeni, da je za materialom dokumentacija. Identiteta je potrjena, čistost izmerjena, rezultati so povezani z eno serijo, izdelek pa se prodaja samo za laboratorijsko uporabo. Vendar izraza ne opredeljuje noben regulativni organ, zato sam po sebi ne obljublja ničesar. Pomen mu dajo dokumenti. Oznaka ne.
Kako lahko trditev o čistosti preverite sami?
Začnite z ujemanjem dokumenta in viale. Številka serije na etiketi mora biti navedena na certifikatu. Nato preverite, ali certifikat navaja neodvisni laboratorij. Poročati mora podatek o čistosti HPLC in rezultat identitete, z masno spektrometrijo ali s HPLC v primerjavi z referenčnim standardom. Prikazati mora tudi datum testiranja. Če karkoli od tega manjka, podatek obravnavajte kot nepreverjen.