Tīrība un laboratorijas testi
Ja tīrības rādītāju nevar pārbaudīt, tas ir tikai mārketings. Lūk, ko patiesībā mēra katrs tests, kas ir šī rādītāja pamatā.
- Ko pasaka 99% HPLC tīrības rādītājs?
- Ko mēra masspektrometrija?
- Kā notiek HPLC testēšana?
- Ko aptver kvalitātes kontrole?
- Kāpēc vajadzīga gan HPLC, gan masspektrometrija?
- Kad testēšana ir patiesi trešās puses testēšana?
- Kāpēc partijām jābūt vienveidīgām?
- Kā jālasa HPLC hromatogramma?
- Kāpēc testēt endotoksīnus?
- Vai „pētniecības kvalitāte” kaut ko nozīmē?
- Kā pašam pārbaudīt tīrības apgalvojumu?
Ko pasaka 99% HPLC tīrības rādītājs?
Tas pasaka, ka 99% no materiāla, ko detektors uztvēra, sadalīšanas laikā parādījās kā mērķa pīķis. Tā ir pīķu laukumu attiecība, nevis pilns flakona satura sadalījums. Tajā nav ņemts vērā ūdens, sāļu atlikumi un, kas ir būtiski, vai šis pīķis ir pareizā molekula. Identitātei vajadzīgs atsevišķs tests.
Ko mēra masspektrometrija?
Tā pārvērš paraugu jonos un mēra to masas un lādiņa attiecību. Peptīdam tā atrisina identitātes jautājumu. Vai izmērītā masa atbilst masai, kas aprēķināta no paredzētās sekvences? Vienkārši sakot, HPLC parāda, cik tīrs ir paraugs. Masspektrometrija parāda, kas paraugs patiesībā ir.
Kā notiek HPLC testēšana?
HPLC nozīmē augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju. Paraugs zem spiediena tiek izspiests cauri blīvi pildītai kolonnai. Katra sastāvdaļa pārvietojas savā ātrumā atkarībā no tā, cik stipri tā pieķeras kolonnas materiālam. Tāpēc sastāvdaļas iznāk dažādos laikos. Detektors katru reģistrē kā pīķi. Salīdzinot pīķu laukumus, iegūst tīrības rādītāju.
Ko aptver kvalitātes kontrole?
Kvalitātes kontrole nozīmē pārbaudes, kas partijai jāiztur pirms izlaišanas. Tās aptver identitāti, tīrību un izskatu, kā arī sterilitāti un endotoksīnus, ja tie ir attiecināmi. Vissvarīgākā ir dokumentēšana. Katrs rezultāts tiek reģistrēts pie partijas numura. Tādējādi jebkuru atsevišķu flakonu var izsekot līdz precīziem datiem, uz kuru pamata tas tika izlaists.
Kāpēc vajadzīga gan HPLC, gan masspektrometrija?
Katra no tām atbild uz citu jautājumu, un neviena nevar aizstāt otru. HPLC sadala maisījumu un parāda, kāda tā daļa ir galvenā sastāvdaļa. Tā ir tīrība. Masspektrometrija nosver molekulu un apstiprina, ka tas ir paredzētais savienojums. Tā ir identitāte. Paraugs var būt 99% viena viela un tomēr būt nepareizā viela.
Kad testēšana ir patiesi trešās puses testēšana?
Kad testu veic un pārskatu pati izsniedz laboratorija, kurai nav intereses par iznākumu. Sertifikāts ar neatkarīgās laboratorijas nosaukumu un atsauces numuru atbilst šai prasībai. Piegādātāja iekšējais rezultāts, kas pārrakstīts zīmola veidnē, neatbilst. Tas attiecas neatkarīgi no tā, cik oficiāli veidne izskatās.
Lasīt vairāk: analīzes sertifikāta lasīšana rindu pa rindai →
Kāpēc partijām jābūt vienveidīgām?
Rezultāts, ko neviens nevar atkārtot, nav īsts rezultāts. Ja materiāls mainās no partijas uz partiju, jebkura novērotā atšķirība var būt partijas, nevis pārbaudāmā mainīgā dēļ. Dokumentācija katrai partijai pārvērš „to pašu partiju” par reģistrētu faktu, nevis minējumu.
Kā jālasa HPLC hromatogramma?
Uz x ass ir aiztures laiks. Uz y ass ir detektora signāls. Augstais pīķis ir Jūsu savienojums, un tā aiztures laikam jāsakrīt ar references paraugu. Pēc tam aplūkojiet trīs lietas. Vai bāzes līnija starp pīķiem ir tīra? Vai tuvu galvenajam pīķim nav sablīvējušies mazi pīķi? Vai galvenais pīķis ir simetrisks? Plecs vai stiepta aste norāda uz piemaisījumu, kas iznāk no kolonnas kopā ar to.
Kāpēc testēt endotoksīnus?
Endotoksīni ir baktēriju šūnu sienas fragmenti. Tie saglabājas pēc sterilizācijas un var izkropļot bioloģiskās analīzes. Parastais tests ir LAL tests, un rezultātus norāda endotoksīnu vienībās. Endotoksīni ir atsevišķs jautājums no sterilitātes. Paraugā var nebūt neviena dzīva organisma, un tajā tomēr var būt endotoksīni, ko atstājušas agrāk iznīcinātas baktērijas.
Vai „pētniecības kvalitāte” kaut ko nozīmē?
Ideālā gadījumā tas nozīmē, ka aiz materiāla ir dokumentācija. Identitāte ir apstiprināta, tīrība izmērīta, rezultāti piesaistīti vienai partijai, un produkts tiek pārdots tikai laboratorijas lietošanai. Taču neviena regulatīvā iestāde šo terminu nedefinē, tāpēc pats par sevi tas neko negarantē. Nozīmi tam piešķir dokumenti, nevis etiķete.
Kā pašam pārbaudīt tīrības apgalvojumu?
Sāciet, salīdzinot dokumentu ar flakonu. Partijas numuram uz etiķetes jābūt norādītam sertifikātā. Pēc tam pārliecinieties, ka sertifikātā nosaukta neatkarīga laboratorija. Tajā jābūt norādītam HPLC tīrības rādītājam un identitātes rezultātam, kas iegūts ar masspektrometriju vai ar HPLC pret references standartu. Tajā jābūt norādītam arī testēšanas datumam. Ja kāda no šīm ziņām trūkst, uzskatiet rādītāju par nepārbaudītu.
Lasīt vairāk: analīzes sertifikāta lasīšana rindu pa rindai →